Súmula de disciplina |
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Métodos de Biologia Molecular Aplicados ao Estudo de Proteínas de Membrana |
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Objetivo: | |||||||
O objetivo desta disciplina é propiciar ao aluno de pós-graduação a oportunidade de se aprofundar em aspectos da fisiologia celular importantes ao entendimento da expressão gênica, compreendendo desde a análise do DNA ao processamento final da proteína sintetizada. Além disso, os alunos têm a oportunidade de realizar no laboratório experimentos envolvendo as principais técnicas de Biologia Molecular. As discussões de temas mais específicos estão voltadas às proteínas de transporte iônico através das membranas celulares. | |||||||
Justificativa: | |||||||
A discussão de fisiologia celular com uma abordagem molecular é fundamental para a formação de nossos alunos, considerando o momento atual das ciências biológicas. Estamos vivenciando atualmente uma era pós-genômica, na qual as perguntas biológicas fundamentais se referem ao entendimento funcional do genoma, cuja seqüência de nucleotídeos está praticamente definida. | |||||||
Conteúdo: | |||||||
Introdução: Biologia Molecular e a Ciência Contemporânea . Análise da interação entre macromoléculas. Estrutura do DNA. Estrutura dos cromossomas. Duplicação e reparo do DNA. Síntese de DNA "in vitro". Estrutura dos genes. RNA - O processo de transcrição. Controle do processo de transcrição e a diferenciação celular. Decodificação do código genético. Síntese de proteínas. Processamento da proteína após a síntese. Direcionamento das proteínas. Modulação da expressão das proteínas. Clonagem de DNA - Construção de bibliotecas. Expressão de proteínas em sistemas heterólogos. Métodos para supressão da expressão de um gene. Estudo de promotores com a utilização de genes repórteres. Hibridização de ácidos nucléicos. Métodos para construção de sondas PCR: Polymerase Chain Reaction Aplicações especiais da técnica de PCR. Aulas práticas: Apresentação do laboratório. Discussão dos cuidados essenciais em um laboratório de Biologia Molecular. Extração de DNA genômico. Quantificação do DNA e Eletroforese em gel de agarose. Extração de RNA de diferentes tipos de tecidos . Quantificação do RNA - Gel para eletroforese Northern - blot Extração de DNA de plasmídeo Digestão do plasmídeo com enzima de restrição. PCR: Polymerase Chain Reaction. | |||||||
Bibliografia: | |||||||
1 - Molecular Biology of the Cell. Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, Peter Walter. 4a. Ed. 2002 Garland Science.2 - Current Protocols in Molecular Biology .Frederick M. Ausubel, Roger Brent, Robert E. Kingston, David D. Moore, J.G. Seidman, John A. Smith, Kevin Struhl John Wiley & Sons Inc. - Atualização a cada 4 meses. 3 - Molecular Cloning. A laboratory Manual. Joseph Sambrook, David W. Russel. 3a. Ed. 2001 Cold Spring Harbor, New York. 4 - PCR Applications - Protocols for functional genomics. Michael Innis, David H. Gelfand, John J. Sninsky. Academic Press - 1999. Artigos de periódicos selecionados a cada curso, referentes a biologia molecular de transportadores iônicos de membrana. Cada aluno deve apresentar pelo menos um trabalho, em forma de seminário. |