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titulo: A resistência à insulina reduz a expresssão do gene do GLUT4 na presença e na ausência de obesidade
linha: Mecanismos fisiopatológicos envolvidos na resistência insulínica. Obesidade e Diabetes mellitus.
projeto: Avaliação do GLUT4 em ratos obesos de 12 meses de idade.
area: Fisiologia
biblioteca: Biblioteca do Instituto
Ciências Biomédicas - USP
volumes: 1
num_paginas: 123
idioma: português
palavras_chave: Resistência
insulínica; GLUT4; Obesidade;Glândula Pineal; Melatonina;
Estabilidade de mRNA.
resumo:
A resistência à insulina
reduz a expressão do gene do GLUT4 na presença e na ausência
de obesidade
GLUT4 é a principal proteína
transportadora de glicose em diferentes tecidos e encontra-se associada
a vesículas intracelulares nos tecidos musculares esqueléticos
e cardíaco, e tecido adiposo. Em resposta à insulina estas
vesículas são translocadas para a membrana plasmática
e captam glicose intensamente neste tecidos insulino-sensíveis.
Um dos principais mecanismos geradores de resistência à insulina
é a alteração do transporte de glicose via expressão
gênica anormal do GLUT4 em tecidos musculares e adiposo. Duas condições
são capazes de gerar resistência à insulina: obesidade
e ausência do hormônio melatonina. Assim este projeto foi dividido
em dois protocolos. Protocolo I, no qual foi investigada a expressão
gênica do GLUT4 nos tecidos insulino-sensíveis de ratos obesos
e emagrecidos. Protocolo II, no qual foi investigada a expressão
gênica do GLUT4 em tecidos insulino-sensíveis de ratos pinealectomizados.
Na análise de expressão do gene do GLUT4 foi quantificado
o conteúdo de proteína (Western blotting) e de mRNA (Northern
blotting) do GLUT4. Além disso foi analisada a estabilidade da molécula
de mRNA do GLUT4 no tecido muscular gastrocnêmio dos animais obesos
e emagrecidos. Os animais utilizados no Protocolo I foram ratos de 12 meses
de idade (12-mo O), os quais apresentam a instalação espontânea
de obesidade, associada a resistência à insulina, e ratos
de 12 meses de idade que aos 11 meses foram submetidos a uma restrição
calórica, e portanto, ao completarem 12 meses apresentavam redução
de 18% no peso corpóreo (12-mo L). Ratos de 2 meses de idade (2-mo)
foram utilizados como controles. No Protocolo II, ratos de 2 meses de idade
foram submetidos a uma cirurgia de remoção da glândula
pineal (grupo PNX), e estudados aos 3 meses de idade, comparados a ratos
controles (3-mo). Foram extraídos o tecido adiposo branco periepididimal
(WAT), músculo esquelético (extensor longo dos dedos - EDL;
sóleo; gastrocnêmio), adiposo marrom (BAT) e coração,
e quantificados conteúdos de mRNA e de proteína GLUT4. No
BAT: nenhuma alteração no GLUT4 dos animais 12-mo O, porém
aumento de 60% (mRNA) e 30% (proteína) no conteúdo do GLUT4
nos animais 12-mo L; nos animais PNX, manutenção do mRNA,
mas redução de 31% na proteína. No coração:
nenhuma alteração na expressão do GLUT4 nos animais
12-mo O e 12-mo L; nos PNX, nenhuma alteração no mRNA, porém
redução de 22% na proteína. No gastrocnêmio:
nenhuma alteração na proteína, porém aumento
de 44% no mRNA dos animais 12-mo O e redução de 34 % nos
animais 12-mo L comparados aos obesos; nos PNX, sem alteração
no mRNA, mas redução de 34 % no conteúdo de proteína
GLUT4. Nos sóleo e EDL: sem alterações na expressão
do GLUT4 nos animais 12-mo O e 12-mo L. No WAT: redução de
70% nos animais 12-mo O, 12-mo L e PNX tanto no mRNA como na proteína
GLUT4. Estabilidade do mRNA do GLUT4: mRNAs do animais 12-mo O e
12-mo L apresentam uma redução (60% e 100%) no tamanho da
cauda poli-A. Em resumo, a resistência à insulina acompanha-se
de uma redução tecido-específica na expressão
do gene do GLUT4 independentemente da presença de obesidade.
orientadores: Ubiratan Fabres Machado
financiadores: Bolsa CNPq (48 meses)
banca: Ubiratan Fabres Machado;
Regina Celia Mello Santiago Moisés;
Fábio Bessa Lima;
Maria Teresa Zanella;
Carla Roberta de Oliveira Carvalho.