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titulo: A resistência à insulina reduz a expresssão do gene do GLUT4 na presença e na ausência de obesidade

linha: Mecanismos fisiopatológicos envolvidos na resistência insulínica. Obesidade e Diabetes mellitus.

projeto: Avaliação do GLUT4 em ratos obesos de 12 meses de idade.

area: Fisiologia

biblioteca: Biblioteca do Instituto Ciências Biomédicas - USP
volumes: 1
num_paginas: 123
idioma: português
palavras_chave: Resistência insulínica; GLUT4; Obesidade;Glândula Pineal; Melatonina; Estabilidade de mRNA.

resumo:
A resistência à insulina reduz a expressão do gene do GLUT4 na presença e na ausência de obesidade
GLUT4 é a principal proteína transportadora de glicose em diferentes tecidos e encontra-se associada a vesículas intracelulares nos tecidos musculares esqueléticos e cardíaco, e tecido adiposo. Em resposta à insulina estas vesículas são translocadas para a membrana plasmática e captam glicose intensamente neste tecidos insulino-sensíveis. Um dos principais mecanismos geradores de resistência à insulina é a alteração do transporte de glicose via expressão gênica anormal do GLUT4 em tecidos musculares e adiposo. Duas condições são capazes de gerar resistência à insulina: obesidade e ausência do hormônio melatonina. Assim este projeto foi dividido em dois protocolos. Protocolo I, no qual foi investigada a expressão gênica do GLUT4 nos tecidos insulino-sensíveis de ratos obesos e emagrecidos. Protocolo II, no qual foi investigada a expressão gênica do GLUT4 em tecidos insulino-sensíveis de ratos pinealectomizados. Na análise de expressão do gene do GLUT4 foi quantificado o conteúdo de proteína (Western blotting) e de mRNA (Northern blotting) do GLUT4. Além disso foi analisada a estabilidade da molécula de mRNA do GLUT4 no tecido muscular gastrocnêmio dos animais obesos e emagrecidos. Os animais utilizados no Protocolo I foram ratos de 12 meses de idade (12-mo O), os quais apresentam a instalação espontânea de obesidade, associada a resistência à insulina, e ratos de 12 meses de idade que aos 11 meses foram submetidos a uma restrição calórica, e portanto, ao completarem 12 meses apresentavam redução de 18% no peso corpóreo (12-mo L). Ratos de 2 meses de idade (2-mo) foram utilizados como controles. No Protocolo II, ratos de 2 meses de idade foram submetidos a uma cirurgia de remoção da glândula pineal (grupo PNX), e estudados aos 3 meses de idade, comparados a ratos controles (3-mo). Foram extraídos o tecido adiposo branco periepididimal (WAT), músculo esquelético (extensor longo dos dedos - EDL; sóleo; gastrocnêmio), adiposo marrom (BAT) e coração, e quantificados conteúdos de mRNA e de proteína GLUT4. No BAT: nenhuma alteração no GLUT4 dos animais 12-mo O, porém aumento de 60% (mRNA) e 30% (proteína) no conteúdo do GLUT4 nos animais 12-mo L; nos animais PNX, manutenção do mRNA, mas redução de 31% na proteína. No coração: nenhuma alteração na expressão do GLUT4 nos animais 12-mo O e 12-mo L; nos PNX, nenhuma alteração no mRNA, porém redução de 22% na proteína. No gastrocnêmio: nenhuma alteração na proteína, porém aumento de 44% no mRNA dos animais 12-mo O e redução de 34 % nos animais 12-mo L comparados aos obesos; nos PNX, sem alteração no mRNA, mas redução de 34 % no conteúdo de proteína GLUT4. Nos sóleo e EDL: sem alterações na expressão do GLUT4 nos animais 12-mo O e 12-mo L. No WAT: redução de 70% nos animais 12-mo O, 12-mo L e PNX tanto no mRNA como na proteína GLUT4. Estabilidade do mRNA do GLUT4:  mRNAs do animais 12-mo O e 12-mo L apresentam uma redução (60% e 100%) no tamanho da cauda poli-A. Em resumo, a resistência à insulina acompanha-se de uma redução tecido-específica na expressão do gene do GLUT4 independentemente da presença de obesidade.

orientadores: Ubiratan Fabres Machado

financiadores: Bolsa CNPq (48 meses)

banca: Ubiratan Fabres Machado;
Regina Celia Mello Santiago Moisés;
Fábio Bessa Lima;
Maria Teresa Zanella;
Carla Roberta de Oliveira Carvalho.