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titulo: Efeitos dos agonistas dos receptores ativados por proliferadores de peroxissoma alfa e gama (PPAR alfa e gama) em células Jurkat (linfócito T) e Raji (linfócito B).

linha: Metabolismo Celular e sua Regulação

projeto: Importância da transferência de lipídios entre células

area: Fisiologia Endócrina

biblioteca: Biblioteca do Instituto de Ciências Biomédicas I
volumes: 1
num_paginas: 166
idioma: português
palavras_chave: Jurkat (linfócito T); Raji (linfócito B); PPAR; apoptose; ciglitizona; 15d PGJ2

resumo: PPARs, receptores ativados por proliferadores de peroxissoma são fatores de transcrição envolvidos na regulação de diversos aspectos metabólicos e funcionais celulares incluindo a  funcionalidade de leucócitos. Muitos compostos naturais apresentam alta afinidade pelo PPAR alpha dentre eles, ácido graxos poliinsaturados de cadeia longa e eicosanóides, como ácido linoléico e leucotrieno B4 e ainda os fibratos (agonistas sintéticos do PPAR alfa) também apresentam alta afinidade pelo receptor. Os agonistas do PPAR gama incluem compostos sintéticos como as tiazolidinedionas e compostos naturais como a 15 deoxi-delta12,14 prostaglandina J2 (15d PGJ2). Com o intuito de estudar o papel dos PPARs como reguladores das funções e metabolismo de linfócitos, identificamos por RT-PCR e imunocitoquímica a presença dos PPARs em células Jurkat (linfócito T) e em células Raji (linfócito B) e utilizamos como estratégia de trabalho o emprego de agonistas sintéticos dos PPARs alfa (clofibrato e WY 14643) e gama (ciglitazona e 15d PGJ2). Desde que estes agonistas podem exercer seus efeitos via mecanismos dependentes e independentes dos PPARs  descriminamos se os efeitos dos agonistas em células Jurkat e Raji ocorriam ou não via receptor. Em ambos os tipos celulares, os PPARs são fatores de transcrição funcionais, porém a dimerização deste com RXR é imprescindível, pois tanto os agonistas do PPAR gama (ciglitizona) e do alfa (WY 14643) quanto os ácidos graxos são ativadores deste receptor apenas na presença do ácido 9-cis retinóico. Os agonistas do PPAR gama per se, mas não os do PPAR alfa, apresentaram efeito antiproliferativo em células Jurkat e Raji, devido, em parte, à perda de integridade de membrana como demonstrado pelo ensaio de viabilidade celular. O tratamento com agonistas do PPAR gama (ciglitizona 40 microM e 15d PGJ2 10 microM), além de reduzirem a viabilidade celular, diminuíram a produção de IL-2 (Jurkat) e IL-10 (Raji) e induziram ambos os tipos celulares à morte por apoptose, conforme observado pelo ensaio de fragmentação de DNA e confirmado pelos ensaios de condensação de cromatina, externalização de fosfatidilserina e despolarização de mitocôndria. A expressão de genes pró-apoptóticos bax, caspase 3, bcl-xS e p-53 e anti-apoptótico bcl-2, bcl-xL foram investigadas e a redução da expressão de c-myc pode estar envolvida no desencadeamento do processo apoptótico. A ativação do PPAR gama, por ciglitizona e ácido 9-cis retinóico, resultou em aumento na expressão de genes relacionados com a transdução de sinal, fatores de transcrição, ciclo celular, defesa e reparo, apoptose e síntese de DNA e ainda diminuem a atividade da glicose-6-fosfato desidrogenase. Finalmente, associado ao fato dos ativadores do PPAR gama alterarem a secreção da  IL-2 em células Jurkat e IL-10 em células Raji, podemos sugerir que os PPARs podem regular o crescimento, metabolismo e a função de linfócitos.

orientadores: Prof Dr Rui Curi

financiadores: CAPES/PICDT (36 meses)

banca: Prof Dr Fernando Salvador Moreno
Prof Dra Nancy Amaral Rebouças
Prof Dra Maria Tereza Nunes
Prof Dra Rosário Dominguez Crespo Hirata
Presidente da banca: Prof Dr Rui Curi

vinculo_empregaticio: Com vínculo
tipo_instituicao: Instituição de Ensino e Pesquisa
espectativa_atuacao: Ensino e Pesquisa
area_titulacao: sim