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titulo: Caracterização eletrofisiológica e funcional das células MDCK C11

linha: Transporte em Epitélio

projeto: Eletrofisiologia em células MDCK C11

area: Fisiologia de Órgãos e Sistemas

biblioteca: Biblioteca do Instituto de Ciências Biomédicas I
volumes: 1
num_paginas: 129
idioma: Português
palavras_chave: transporte de íons;transporte epitelial:eletrofisiologia;células MDCK C11;cultura de células;transporte de cloreto

resumo: As células MDCK, derivadas de rins de cães normais, podem ser cultivadas para formar monocamadas celulares polarizadas, com propriedades morfológicas e funcionais de epitélios transportadores, que produzem um fluxo de água do lado apical para o basolateral discriminando íons por meio de canais iônicos e bombas inseridos de forma polarizada. Acredita-se que estas células representem as presentes nas porções distais do néfron de mamífero, e têm sido utilizadas como modelo para o estudo dos mecanismos de transporte de íons e água nestas estruturas. O ducto coletor do néfron de rim de mamíferos é formado por dois tipos celulares: as células principais envolvidas na secreção de K+ e na reabsorção de Na+, e as células intercalares, responsáveis pela regulação do equilíbrio ácido-base. As células intercalares se subdividem ainda em dois sub-tipos: as células intercalares do tipo a, que secretam H+ e reabsorvem HCO3-, e as do tipo b, que transportam estes íons com polaridade inversa. Da mesma forma, foram descritos dois tipos de células MDCK que diferem quanto as propriedades morfológicas e funcionais, denominados de células C7 e C11. Os relatos sugerem uma semelhança das células C7 com as células principais e das C11 com as células intercalares. Evidências sugerem que a população de células C11 também é heterogênea. Ao contrário do que ocorre com as culturas de células MDCK heterogêneas (com células C7 e C11), a literatura disponível sobre as células MDCK C11 ainda é limitada. Uma metodologia para a medida dos parâmetros eletrofisiológicos, utilizando uma câmara de Ussing especialmente desenvolvida e técnica de clampeamento de voltagem, em epitélios formados por células cultivadas sobre filtros permeáveis foi utilizada para a caracterização eletrofisiológica e funcional das monocamadas de células MDCK C11, enfocando os mecanismos de secreção de Cl- e H+, além dos mecanismos de regulação do volume celular. Os resultados mostram que 1) o epitélio formado por estas células é, de fato, heterogêneo quanto a polaridade da secreção de Cl- e de H+ indicando que os dois sub-tipos de células intercalares, a e b, estão presentes e 2) cotransportadores Na+/2Cl-/K+ estão presentes na membrana basolateral (e provavelmente na apical também), mas só se ativam durante a regulação e manutenção do volume celular.

orientadores: Sonia Malheiros Lopes Sanioto

financiadores: Bolsa da FAPESP de 54 meses

banca: Sonia Malheiros Lopes Sanioto
Márcia Martins
Francisco Lacaz
José Amorin
Joaquim Araújo Procópio Filho

vinculo_empregaticio: Com vínculo
tipo_instituicao: Instituição de Ensino e Pesquisa
espectativa_atuacao: Ensino e Pesquisa
area_titulacao: sim