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titulo: Modulação do Transporte de Prótons por Ácidos Graxos em Bicamadas Lipídicas Planas

linha: Biofísica de epitélios e canais iônicos

projeto: Efeito de ácidos graxos nas propriedades elétricas de bicamadas lipídicas planas

area: Biofísica de Processos e Sistemas; Biofísica Celular; Biofísica Molecular e Biologia Molecular

Biblioteca do Instituto de Ciências Biomédicas I
volumes: 1
num_paginas: 70
idioma: Português
palavras_chave: transporte de prótons; ácidos graxos; condutância; permeabilidade; corrente de curto-circuito

resumo: Nós estudamos dois aspectos do gradiente transmembrana de prótons: 1) o efeito de agentes dissipativos, tendo como modelo ácidos graxos (AG) de cadeia longa e; 2) o efeito de agentes anti-vazamento do gradiente de prótons  usando, como modelo, o colesterol.
Usamos como modelo de membranas naturais as bicamadas lipídicas planas (BLP). As BLPs foram formadas de acordo com o método de MUELLER et alii (1963) em um orifício circular (0.4 a 1.0 mm de diâmetro) de um copo de polipropileno, acoplado a uma câmara de acrílico, definindo dois compartimentos: CIS e TRANS. Ambos compartimentos eram inicialmente simétricos em composição.
A diferença de potencial elétrico (DP), a condutância total da membrana (Gm) e a corrente de curto-circuito (CCC) foram mensuradas com um eletrômetro de alta impedância (2 x 1014 ohm).
Dois tipos de fosfolipídios foram usados: Asolecitina (negativamente carregada) e DPhPC (neutro). Quatro grupos experimentais foram usados para a análise do transporte de prótons através da bicamada lipídica plana: Asolecitina, Asolecitina/colesterol, DPhPC e DPhPC/colesterol. Essas membranas eram expostas a diferenças de pH (0.4 -2.0 unidades) pela adição de ácido sulfúrico ao compartimento CIS. Posteriormente, alíquotas iguais de ácido palmítico eram adicionadas bilateralmente.
Para a análise dos resultados obtidos experimentalmente, um programa computacional foi escrito em BASIC (Chnew.bas). Esse programa divide a condutância da membrana em uma via inespecífica e uma via de próton, onde Gtotal = GH+ + Gleak. Esse programa está baseado no fato que existe somente um par de valores de GH+ e Gleak que satisfazem os valores medidos da DP e da CCC, sobre a condição experimental da diferença de pH.
A permeabilidade a próton foi calculada a partir da CCC.
A analise estatística dos resultados foi realizada com o programa Prisma 3.0.
Resultados: Nas membranas de Asolecitina, AP promoveu um aumento substancial na seletividade a próton, mas em membranas de Asolecitina/colesterol o aumento da seletividade induzida pelo AP foi eliminada. Em ambas membranas de DPhPC (DPhPC pura e DPhPC/colesterol o AP não afeito os parâmetros elétricos.
Nossos resultados são discutidos em termos da presença de cagas na membrana fosfolipídica, na interação colesterol/ AP e no colesterol induzindo reorganização das cadeias acila.

orientadores: Joaquim Procopio de Araújo Filho

financiadores: CAPES/Demanda Social
duração: 24 meses

banca: Joaquim Procópio de Araujo Filho, Carmem Maldonado Peres, Gerhard Malnic.

vinculo_empregaticio: Bolsista
tipo_instituicao: Instituição de Ensino e Pesquisa
espectativa_atuacao: Ensino
area_titulacao: sim