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titulo: Regulação da expressão gênica da mioglobina (mb) por hormônio tireoideano no músculo cardíaco de ratos

linha: Regulação de expressão gênica por hormônio tireoideano e metabólitos

projeto: Papel dos hormônios tireoideanos (HT) na regulação da expressão da mioglobina em músculo esquelético e cardíaco de ratos

area: Fisiologia Endócrina

biblioteca: Instituto de Ciências Biomédicas 1 da USP

volumes: 1

num_paginas: 107

idioma: Português

palavras_chave: Hormônio Tireoideano
Músculo Cardíaco
Mioglobina
Expressão Gênica
Hipotireoidismo
Hipertireoidismo

resumo: A mioglobina (Mb) é uma proteína citosólica, altamente expressa no músculo cardíaco, que apresenta alta afinidade pelo oxigênio (O2) e que facilita o transporte de O2 para o interior das mitocôndrias, desempenhando assim um importante papel no metabolismo oxidativo. Sabe-se, ainda, que a atividade muscular é um dos fatores que controlam a expressão dessa proteína. Considerando que o hormônio tireoideano exerce efeitos diretos e indiretos estimulando a atividade cardíaca e, por conseguinte, provocando um aumento do consumo de O2, foi objetivo deste estudo verificar se há expressão diferencial da Mb nos átrios e ventrículos, já que o trabalho desempenhado por esses compartimentos é distinto, e se o hormônio tireoideano altera a expressão desse gene nesses compartimentos. Estudos da evolução temporal (time-course) do conteúdo de RNA mensageiro (RNAm) e da proteína Mb, após administração de T3 (5,0 e100,0 *g/100 g, ev) em ratos previamente tireoidectomizados (Tx), tratados com metimazol (0,03%) e cloreto de cálcio (4,5 mM), bem como do efeito da administração de diferentes doses de T3 (0,3; 1,0; 5,0; 12,5; 25,0; 50,0; 100,0 *g/100 g) sobre esses parâmetros (curva dose-resposta) foram desenvolvidos com esse objetivo. Estudos posteriores visando avaliar se, no efeito estudado, havia a participação de proteínas recém-sintetizadas, animais tireoidectomizados foram tratados 100 *g de T3 /100 g, ev, após terem recebido ciclohexamida (200 *g /100 g de peso corporal, ip). Animais falso-operados também foram incluídos nesses estudos. Após a decapitação, os músculos atrial e ventricular foram excisados para avaliação do conteúdo de RNAm e da proteína Mb por Northern blot e Western blot, respectivamente. Após autorradiografia da membrana, seguiu-se a quantificação do RNAm e da proteína por densitometria. Observou-se que a abundância do RNAm da Mb diminuiu nos ratos tireoidectomizados (átrio e ventrículo) e aumentou (ventrículo) pela administração de T3 nas doses de 5,0, 12,5 e 25,0 *g/100 g. Nos estudos de time-course, utilizando-se a dose de 5,0 *g/100 g de T3, ev, observou-se elevação do conteúdo de RNAm da Mb no átrio e ventrículo, já aos 10 minutos, valores que atingiram os níveis detectados no grupo eutiroideo, aos 60 min. A administração de doses saturantes de T3 (100,0 *g/100 g) elevou a expressão gênica da Mb no ventrículo após 30 min, atingindo um valor máximo após 24 h da injeção, enquanto no átrio elevação significativa desse parâmetro só pode ser observado aos 120 min. da injeção. Os estudos de Western blot mostraram que administração de 5,0 *g/100 g de T3, por 5 dias provocou em ratos Tx a elevação do conteúdo da Mb em átrio e ventrículo. A administração de dose saturante de T3 elevou a expressão da Mb no ventrículo após 120 min. Esses resultados levantam a possibilidade de que a expressão basal do gene da mioglobina no átrio e ventrículo depende de hormônio tireoideano. O efeito observado é dose-dependente, sugerindo ação específica do hormônio tireoideano A diferença de expressão entre átrio e ventrículo indica a existência de uma regulação diferencial desse gene nesses tecidos.

orientadores: Prof. Dra. Maria Tereza Nunes

financiadores: bolsa de doutoradoFundação de Amparo Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) por 4 anos.

vinculo_empregaticio: Bolsista
tipo_instituicao: Instituição de Ensino e Pesquisa
espectativa_atuacao: Pesquisa
area_titulacao: sim